Published at 2020-11-05 20:11
Author：zhangz
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快速革兰氏定性法：在干净的载玻片上滴1-2滴3%（W/V）KOH溶液，挑一环菌体涂在KOH溶液中，用接种针充分搅动，直至菌体完全溶解在KOH溶液中。当接种针从溶有菌体的KOH挑起5-8cm高度观察到有丝状物出现时，则表明该供菌体的革兰氏染色反应为阴性；若接种针从溶有菌体的KOH挑起无丝状物出现时，那么该供试菌的革兰氏染色反应就为阳性。
原理：革兰阴性细菌的细胞壁在稀碱溶液中易于破裂,释放出未断裂的DNA螺旋,使氢氧化钾菌悬液呈现粘性,可用接种环搅拌后拉出粘丝来,而革兰阳性细菌在稀碱溶液中没有上述变化.
注意事项：
氢氧化钾拉丝试验是非常敏感的,主要用于革兰阴性菌与易脱色的革兰阳性菌的鉴别。所以说阳性的基本上可以肯定就是革兰氏阴性菌,当然要排除一下是否是黏液造成的假阳性。
革兰阳性菌培养物如超过48小时,也可能随着菌龄增加而失去革兰阳性菌的特性,而使本试验从阴性变成阳性，即出现假阳性。如果不确定再做个革兰氏染色!不过革兰氏染色的灵敏度没氢氧化钾拉丝试验高!
氢氧化钾拉丝试验更容易出现假阴性（某些细菌需要的时间长才能拉出丝,与个人经验严重相关），出现假阳性可能性很小。
